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T  É  C  N  I  C  A  S      E  X  P  E  R  I  M  E  N  T  A  I  S

Modelo experimental de epilepsia | Análise comportamento e memória | Estereotaxia

Microscopia de Luz | Microscopia de fluorescência | Microscopia eletrônica de transmissão

Biologia celular | Biologia molecular

 
 

  ::  INDUÇÃO DO STATUS EPILEPTICUS (SE)  ::  

  

   Protocolo indução SE por meio da Pilocarpina

   Protocolo indução SE por meio do Ácido Caínico

   Protocolo indução SE por meio da Ácido Domóico

   Protocolo indução SE por meio do Pentilenotetrazol (PTZ)

   Protocolo indução SE por meio do abrasamento (kindling)

 
  ::  ANÁLISE DE COMPORTAMENTO E MÉMORIA  ::   

    Protocolo do Labirinto Aquático de Morris

    Protocolo do Labirinto em T

    Protocolo do Labirinto em Cruz Elevado

 

  ::  ESTEREOTAXIA  ::

  Protocolo para implantação de eletrodos no encéfalo

  Protocolo para administração fármacos ou toxinas

  Protocolo para cirurgia neo-natal

  

  ::  MICROSCOPIA DE LUZ   ::  (ler)

              (Histologia / Imunomarcação)

       Protocolo da Coloração de Nissl (Cresil Violeta) e Hematoxilina

       Protocolo marcação zinco (neo-Timm)

      Protocolo marcação degeneração neuronal (Dark Cell)

       Protocolo marcação divisão neuronal (BrdU)

      Protocolo marcação de atividade celular (c-fos)

           (esse mesmo protocolo para imuno-hitoquímica por peroxidade pode ser

               utilizado para qualquer outro anticorpo, não só c-fos )

      Protocolo marcação prolongamentos neuronais (Lavina)

       Protocolo acetilcolinesterase

      Protocolo para gelatinar lâminas

     

Dica: As fatias de tecido utilizadas para colorações ou imuno-histoquímicas podem ser guardadas no freezer, desde que imersas em solução anticongelante (antifreezer), a qual contem 500mL de tampão fosfato + 300g de sacarose + 300mL de Etileno Glicol.

 

Dicas obrigatórias para uso do Criostato: (ler)

Implicação na qualidade final da microscopia de luz

 

  ::  MICROSCOPIA DE FLUORESCÊNCIA  ::  (ler)

                             Em Construção

 

  ::  MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO  ::  (ler)

                  (Histologia / Imunomarcação)

    Protocolo imunomarcação pré-emblocamento

    Protocolo imunomarcação pós-emblocamento

    Protocolo marcação zinco (neo-Timm) em microscopia eletrônica

    Contagem de sinapses por meio de estereologia

             
  ::  BIOLOGIA CELULAR  :

    Protocolo de obtenção e cultivo das células-tronco mesenquimais de medula óssea

   Protocolo de obtenção e cultivo de células-tronco neurais

 

  ::  BIOLOGIA MOLECULAR  ::  

 

             Expressão gênica em modelos experimentais de epilepsia
             Tutorial - Síntese de Primers
 

Informações Disponíveis na Internet:

Informações sobre Diversas Técnicas

Ilustrações Histológicas e Citológicas

 

                                              Copyright©  1994 - 2008, Universidade Federal de São Paulo

 

Status

 

                                      

 

DICAS obrigatórias para uso do CRIOSTATO:

> O ângulo horizontal da lâmina que corta o tecido  "deve"  permanecer na marca entre 0 - 5:

Fora dessa marcação ocorre maior trepidação quando da obtenção das fatias e isso traz prejuízos tanto a sua fatia quanto ao Criostato.  Estando a lâmina em 0-5 de angulação, consegue-se obter fatias com qualidade numa espessura mínima de até 5 micrometros (segundo suporte técnico do aparelho).

> A lâmina é usada em toda sua extremidade, mas para isso deve-se mexer no dispositivo de lateralização do aparelho, e não na lâmina.

 

> A alavanca que fixa a lâmina no aparelho deve ficar voltada para cima:

Não voltar a alavanca para baixo. Quando voltamos a alavanca para baixo temos uma falsa impressão de estar fixando melhor a lâmina. Porem como a alavanca tem forma de meio cilindro  quanto mais girar mais cairá  fora do encaixe.

> O vasilhame na parte externa e inferior do aparelho tem a função de amparar a água proveniente de processos de degelo do aparelho.  

Deve-se jogar fora essa água. NUNCA permitir que a água atinja o topo do vasilhame.

> As  hastes paralelas onde colocamos os suportes (suportes onde são colados o material), pode atingir temperaturas de -180°C, se necessário  (isso só as hastes, sem interferir no
 restante do aparelho). Para isso é só programar o aparelho.

 

> Não deixar a lâmpada acessa tampouco o criostato aberto quando não estiver em uso, evitando aumentos na temperatura interna do mesmo.
 

>Quando o aparelho estiver muito tempo sem uso, cortar as primeiras fatias com 60 micrometros de espessura, isso faz com que o gelo formado em volta do
pino (pino onde fixamos o suporte com tecido) seja quebrado. Isso evita danos ao aparelho quando for cortar com menos micrometros de espessura.